માનવ ઓસ્ટિઓસારકોમા કોષો પર ગેનોડર્મા લ્યુસીડમની એન્ટિકેન્સર અસર

અમારો અભ્યાસ દર્શાવે છે કે ગેનોડર્મા લ્યુસિડમ/રીશી/લિંગઝી વિટ્રોમાં ઑસ્ટિઓસારકોમા કોષો પર ટ્યુમર વિરોધી ગુણધર્મો દર્શાવે છે.એવું જાણવા મળ્યું હતું કે ગેનોડર્મા લ્યુસિડમ Wnt/β-catenin સિગ્નલિંગને દબાવીને સ્તન કેન્સર સેલ વૃદ્ધિ અને સ્થળાંતરને અટકાવે છે.તે ફોકલ સંલગ્નતાના વિક્ષેપ અને MDM2-મધ્યસ્થ સ્લગ ડિગ્રેડેશનના ઇન્ડક્શન દ્વારા ફેફસાના કેન્સરને દબાવી દે છે.ગેનોડર્મા લ્યુસિડમ PI3K/AKT/mTOR પાથવેને ડાઉન રેગ્યુલેટ કરીને સ્તન કેન્સરને અટકાવે છે, ગાનોડર્મા લ્યુસિડમ MAPK પાથવેને અવરોધિત કરીને તીવ્ર લ્યુકેમિયા કોશિકાઓમાં એન્ટિટ્યુમર ભૂમિકા ભજવે છે.

CCK-8 અને વસાહત રચના એસે, ઓસ્ટિઓસાર્કોમા સેલ લાઇન સદ્ધરતા અને પ્રસાર પર ગેનોડર્મા લ્યુસિડમની અસરનું મૂલ્યાંકન કરવા માટે, દર્શાવે છે કે ગેનોડર્મા લ્યુસિડમ MG63 અને U2-OS કોષોના પ્રસારને સમય- અને એકાગ્રતા-આધારિત રીતે દબાવે છે, અને ઘટાડો કરે છે. કોષોની વસાહતીકરણ કરવાની ક્ષમતા.

ગેનોડર્મા લ્યુસિડમ પ્રોઆપોપ્ટોટિક જનીનોની અભિવ્યક્તિને અપરેગ્યુલેટ કરે છે, અને ફ્લો સાયટોમેટ્રી વિશ્લેષણ દર્શાવે છે કે ગેનોડર્મા લ્યુસિડમ સાથે સારવાર પછી MG63 અને U2-OS કોષોના એપોપ્ટોસિસમાં વધારો થાય છે.કોષ સ્થળાંતર એ એન્જીયોજેનેસિસ, ઘા હીલિંગ, બળતરા અને કેન્સર મેટાસ્ટેસિસ સહિત વિવિધ જૈવિક વર્તણૂકોનો આધાર છે.ગેનોડર્મા લ્યુસિડમ બંને કોષ રેખાઓના સ્થળાંતર અને આક્રમણને ઘટાડે છે અને પ્રસાર, સ્થળાંતર અને આક્રમણને અટકાવે છે અને ઓસ્ટીયોસારકોમા કોષોના એપોપ્ટોસીસને પ્રેરિત કરે છે.

Aberrant Wnt/β-catenin સિગ્નલિંગ અસંખ્ય પ્રકારના કેન્સરની રચના, મેટાસ્ટેસિસ અને એપોપ્ટોસિસ સાથે ગાઢ રીતે સંબંધિત છે, જેમાં Wnt/β-catenin સિગ્નલિંગનું અપગ્ર્યુલેશન ઓસ્ટિઓસારકોમામાં જોવા મળે છે.

આ અભ્યાસમાં, ડ્યુઅલ-લ્યુસિફેરેસ રિપોર્ટર એસેએ દર્શાવ્યું હતું કે ગેનોડર્મા લ્યુસિડમ ટ્રીટમેન્ટ CHIR-99021-સક્રિય Wnt/β-catenin સિગ્નલિંગને અવરોધે છે.અમારા નિદર્શન દ્વારા આ વધુ સાબિત થાય છે કે જ્યારે ઓસ્ટીયોસારકોમા કોષોને ગેનોડર્મા લ્યુસીડમ સાથે સારવાર આપવામાં આવે છે ત્યારે Wnt લક્ષ્ય જનીનોનું ટ્રાન્સક્રિપ્શન, જેમ કે LRP5, β-કેટેનિન, સાયકલિન D1 અને MMP-9, અટકાવવામાં આવે છે.

અગાઉના અભ્યાસોએ ક્લિનિકલ નમૂનાઓમાં દર્શાવ્યું છે કે LRP5 સામાન્ય પેશીઓની તુલનામાં ઑસ્ટિઓસારકોમામાં અપરેગ્યુલેટેડ છે, અને LRP5 ની અભિવ્યક્તિ મેટાસ્ટેટિક રોગ અને નબળા રોગ-મુક્ત અસ્તિત્વ સાથે સંબંધ ધરાવે છે, LRP5 ને ઑસ્ટિઓસારકોમા માટે સંભવિત ઉપચારાત્મક લક્ષ્ય બનાવે છે.

Wnt/β-catenin સિગ્નલિંગ પાથવેમાં β-catenin પોતે એક મુખ્ય લક્ષ્ય છે, અને ઑસ્ટિઓસારકોમામાં β-કેટેનિનની અભિવ્યક્તિ નોંધપાત્ર રીતે વધી છે.જ્યારે β-કેટેનિન સાયટોપ્લાઝમમાંથી ન્યુક્લિયસમાં સ્થાનાંતરિત થાય છે, ત્યારે તે તેના ડાઉનસ્ટ્રીમ લક્ષ્ય જનીનોની અભિવ્યક્તિને સક્રિય કરે છે, જેમાં સાયકલિન D1, C-Myc અને MMPsનો સમાવેશ થાય છે.

Myc એ મુખ્ય પ્રોટો-ઓન્કોજીન્સ પૈકીનું એક છે અને જનીન અભિવ્યક્તિના સક્રિયકરણ, ટ્રાન્સક્રિપ્શન અને અવરોધને નિયંત્રિત કરવામાં મહત્વની ભૂમિકા ભજવે છે. એવું નોંધવામાં આવ્યું છે કે C-Myc ઓન્કોજીનનું દમન વૃદ્ધત્વ અને ઘણા ટ્યુમર સેલ પ્રકારોના એપોપ્ટોસિસને પ્રેરિત કરે છે, જેમાં ઓસ્ટીયોસારકોમા.

Cyclin D1 એ મહત્વપૂર્ણ સેલ સાયકલ G1 ફેઝ રેગ્યુલેટર છે અને G1/S તબક્કાના સંક્રમણને વેગ આપે છે.સાયક્લિન D1 ની વધુ પડતી અભિવ્યક્તિ કોષ ચક્રને ટૂંકી કરી શકે છે અને વિવિધ પ્રકારના ગાંઠોમાં ઝડપી સેલ પ્રસારને પ્રોત્સાહન આપી શકે છે.

MMP-2 અને MMP-9 એ સ્ટ્રોમેલિસિન છે જે એક્સ્ટ્રા સેલ્યુલર મેટ્રિક્સ ઘટકોને ડિગ્રેડ કરવાની ક્ષમતા ધરાવે છે, જે ટ્યુમર એન્જીયોજેનેસિસ અને આક્રમણ માટે નિર્ણાયક લક્ષણ છે.

આ સૂચવે છે કે Wnt/β-catenin લક્ષ્ય જનીનો ઓસ્ટિઓસારકોમાની પ્રગતિમાં મુખ્ય ભૂમિકા ભજવે છે અને આ સિગ્નલ ગાંઠોને અવરોધિત કરવાથી નાટકીય રોગનિવારક અસર થઈ શકે છે.

ત્યારબાદ, અમે PCR અને વેસ્ટર્ન બ્લોટિંગ દ્વારા Wnt/β-catenin સિગ્નલિંગ-સંબંધિત લક્ષ્ય જનીનો mRNA અને પ્રોટીનની અભિવ્યક્તિ શોધી કાઢી.બંને કોષ રેખાઓમાં, ગેનોડર્મા લ્યુસિડમ આ પ્રોટીન અને જનીનોની અભિવ્યક્તિને અટકાવે છે.આ પરિણામો આગળ દર્શાવે છે કે ગેનોડર્મા લ્યુસિડમ LRP5, β-કેટેનિન, C-Myc, સાયક્લિન D1, MMP-2 અને MMP-9 ને લક્ષ્ય બનાવીને Wnt/β-catenin સિગ્નલિંગને અટકાવે છે.

E-cadherin એ એક ટ્રાન્સમેમ્બ્રેન ગ્લાયકોપ્રોટીન છે જે ઉપકલા કોષોમાં વ્યાપકપણે વ્યક્ત થાય છે અને ઉપકલા કોષો અને સ્ટ્રોમલ કોષો વચ્ચે સંલગ્નતાની મધ્યસ્થી કરે છે.E-cadherin અભિવ્યક્તિને કાઢી નાખવા અથવા ગુમાવવાથી ગાંઠના કોષો વચ્ચેના સંલગ્નતાના નુકશાન અથવા નબળાઈ તરફ દોરી જાય છે, ગાંઠના કોષોને વધુ સરળતાથી ખસેડવામાં સક્ષમ બનાવે છે, અને પછી ગાંઠને ઘૂસણખોરી, પ્રસરણ અને મેટાસ્ટેસાઇઝ કરે છે.આ અભ્યાસમાં, અમને જાણવા મળ્યું કે ગેનોડર્મા લ્યુસિડમ ઇ-કેડરિનને અપગ્રેજ્યુલેટ કરી શકે છે, ત્યાંથી ઓસ્ટિઓસારકોમા કોશિકાઓના Wnt/β-કેટેનિન-મધ્યસ્થી ફેનોટાઇપનો સામનો કરી શકે છે.

નિષ્કર્ષમાં, અમારા પરિણામો સૂચવે છે કે ગેનોડર્મા લ્યુસિડમ ઑસ્ટિઓસારકોમા Wnt/β-કેટેનિન સિગ્નલિંગને અવરોધે છે અને આખરે ઑસ્ટિઓસારકોમા સેલ પ્રવૃત્તિમાં ઘટાડો તરફ દોરી જાય છે.આ તારણો સૂચવે છે કે ગેનોડર્મા લ્યુસિડમ ઓસ્ટિઓસારકોમાની સારવાર માટે ઉપયોગી અને અસરકારક ઉપચારાત્મક એજન્ટ હોઈ શકે છે, સંબંધિત ઉત્પાદનોમાં સમાવેશ થાય છે.ગેનોડર્મા લ્યુસિડમ બીજકણ તેલ સોફ્ટજેલ્સ/રીશી બીજકણ ઓઈએલ સોફ્ટજેલ્સ,ગેનોડર્મા લ્યુસિડમ બીજકણ પાવડર/રીશી બીજકણ પાવડર